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2-25
目的:理解低氧預處置對子宮內膜異位癥大鼠模型異位病灶構成的影響,藉此進一步說明EMs發作開展的分子機制,從而為其防治供新思緒。辦法:Lewis雌性大鼠隨機分為兩組,分別給予HPC(8%O2)和常壓常氧(21%O2)處置8h,隨即取其子宮組織移植至正常大鼠腹壁。術后14d記載移植灶體積,并采用ELISA、免疫組化、Westernblot、RT-PCR和Tunnel法,對血清和腹腔液以及移植前子宮組織和移植病灶停止檢測。結果:HPC可顯著上調大鼠子宮血管內皮生長因子(VEGF)m...
2-18
一、原理培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力,由組織中分離細胞一般也要檢查活力,以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用。復蘇后的細胞也要檢查活力,了解凍存和復蘇的效果。用臺盼蘭染細胞,死細胞著色,活細胞不著色,從而可以區分死細胞與活細胞。利用細胞內某些酶與特定的試劑發生顯色反應,也可測定細胞相對數...
2-18
材料:6孔板marker筆直尺20微升槍頭(滅菌)無血清培養基PBS準備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內)流程:1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻地劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2、在空中加入約5X105個細胞,具體數量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。3、第二天用槍頭比著直尺,盡量垂直于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不要傾斜。4、用PBS洗細胞3次,去除劃下的細胞,加入...
2-18
初代培養或原代培養,是從供體獲取組織后的培養。組織和細胞剛剛離體,生物性狀尚未發生很大的變化,具有二倍體遺傳性狀,在供體來源充分、生物條件穩定的情況下(年齡、性別),在一定程度上能反映體內狀態。實驗方法原理消化培養法合成培養基胰蛋白酶消化培養法,能把組織塊分散成細胞團或單個細胞,便于細胞從培養液中攝取營養和排出代謝產物,細胞能較快地長成單層。本法尤適用于培養大量組織,細胞產量高;但用于經常性小量培養工作稍顯繁瑣,無菌操作不良時且易污染。實驗材料組織試劑、試劑盒Hanks培養液...
1-14
原理:腦實質內注射膠原酶,膠原酶破壞血管的基底層,導致滲漏血液流入周圍組織。動物:雄性SD大鼠,年齡10-12周,體重300-350g。麻醉期間,大鼠體溫維持在37度,體溫維持直到從麻醉狀態蘇醒,恢復正常運動為止。建模:大鼠麻醉,固定立體定位儀上,在頭皮上做1cm長的中線切口。用棉簽除去覆蓋在大鼠頭皮上的軟組織,確認顱骨上的Bregma點位置。右側鉆孔的位置:Bregma點前0.6mm,側面2.9mm,微量注射器進入基底節,深度距顱骨平面5.5mm。以0.1ul/min速度注...
1-14
藥品:6-OHDAHCl:16μg溶解在4μLACSF中。ACSF:0.15MNaCl,2.75mMKCl,1.2mMCaCl2,and0.85mMMgCl2。動物:雄性Wistar大鼠,重量300-400g。建模:1.大鼠常規麻醉,然后固定在立體定位儀上。2.暴露大鼠顱骨,在右側內側前腦束(medialforebrainbundle,MFB)上方鉆孔,孔的坐標:(AP),-1.9mm,(ML),-1.9mm,(DV),-7.2mm。3.0.5μL/min,注射4ul,為避免...
12-31
肢體缺血動物模型是進行缺血損傷機制、血管新生等研究的基礎,成功制作一種效果確切、重復性強的肢體缺血模型是保證實驗研究能夠順利進行的關鍵。當前缺血性疾病患者日漸增多,以糖尿病肢體動脈閉塞癥(DAO)、閉塞性動脈硬化癥(ASO)和血栓閉塞性脈管炎(TAO)為主的下肢缺血性疾病發病率逐年增加。國外資料顯示,70歲以上老年人群中僅動脈硬化閉塞癥患病率即可達15%~20%。而患病人群范圍可覆蓋至青壯年,其高發生率和廣泛累及率已嚴重危害著人們的身心健康和生存質量,亟待探索其發生機制、預防...